細(xì)胞活性檢測(cè)方法

細(xì)胞活性的檢測(cè)方法有多種，以下是一些常見的方法：

染色計(jì)數(shù)法：

化學(xué)染色法：如臺(tái)盼藍(lán)染色法，利用死細(xì)胞和活細(xì)胞對(duì)染料的不同親和力，通過顯微鏡觀察細(xì)胞的染色情況來判斷細(xì)胞活性。臺(tái)盼藍(lán)可穿透變性的細(xì)胞膜，與解體的DNA結(jié)合，使其著色，而活細(xì)胞能阻止染料進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，故可以鑒別死細(xì)胞與活細(xì)胞。

熒光染色法：利用熒光染料對(duì)活細(xì)胞和死細(xì)胞的不同反應(yīng)，通過熒光顯微鏡檢測(cè)細(xì)胞活性。例如，碘化丙啶（PI）被活細(xì)胞排斥但能穿透正在死亡或已經(jīng)死亡細(xì)胞的細(xì)胞膜，因此活細(xì)胞不被染料上色，只有死細(xì)胞或凋亡細(xì)胞才能被染上紅色。

代謝活性檢測(cè)：

MTT（3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-2,5-二苯基四氮唑溴化物）試驗(yàn)：通過測(cè)量活細(xì)胞中線粒體脫氫酶的活性來評(píng)估細(xì)胞增殖和活性。

XTT試驗(yàn)：在健康細(xì)胞中，XTT通過線粒體酶轉(zhuǎn)換成橙色的甲瓚染料，然后檢測(cè)450nm處的相對(duì)吸光度來估計(jì)活細(xì)胞數(shù)量。

刃天青檢測(cè)：將刃天青試劑添加到細(xì)胞培養(yǎng)物中，在健康細(xì)胞中，刃天青試劑通過脫氫酶還原成為熒光試鹵靈，最終試鹵靈的量與樣品中的活細(xì)胞成比例。

細(xì)胞增殖能力檢測(cè)：

CCK-8（Cell Counting Kit-8）試驗(yàn)：類似于MTT，但使用水溶性四唑鹽WST-8，減少了實(shí)驗(yàn)步驟。

BrdU（5-溴脫氧尿苷）摻入試驗(yàn)：通過檢測(cè)BrdU在DNA合成期的摻入來評(píng)估細(xì)胞增殖和活性。

細(xì)胞凋亡檢測(cè)：

Annexin V/PI染色：通過流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞膜磷脂酰絲氨酸外翻和細(xì)胞膜完整性來識(shí)別早期和晚期凋亡細(xì)胞。

還原性染料檢測(cè)法：使用發(fā)光/熒光指示劑（如WST-8和刃天青）監(jiān)測(cè)細(xì)胞的代謝活性。

熒光酯酶底物檢測(cè)法：通過測(cè)量細(xì)胞酶活性和膜完整性來確定細(xì)胞活性。細(xì)胞內(nèi)酯酶將底物水解成熒光化合物，熒光化合物的信號(hào)強(qiáng)度與活細(xì)胞數(shù)量成正比。

線粒體膜電位檢測(cè)法：利用線粒體膜電位的變化來評(píng)估細(xì)胞活性。

以上方法各有特點(diǎn)和適用場(chǎng)景，可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)的具體需求和條件選擇合適的方法。