支原體檢測之符合藥典方法驗證

支原體檢測的藥典方法主要包括兩種：分離培養(yǎng)法和指示細(xì)胞法。

分離培養(yǎng)法是檢測支原體的金標(biāo)準(zhǔn)方法，其原理是從樣品細(xì)胞培養(yǎng)體系中取樣，接種到適宜支原體生長的瓊脂平板上。如果樣本中含有支原體，它們就會在這種瓊脂平板上瘋狂生長，最終形成明顯可見的特征性菌落。這種方法很少會出現(xiàn)假陰性結(jié)果，檢測精確度很高，因此被譽為支原體檢測金標(biāo)準(zhǔn)。該方法也是《美國藥典》中認(rèn)可的支原體檢測方法之一。然而，這種方法的缺點是檢測時間太長，支原體要長出明顯克隆至少需要4周時間。

指示細(xì)胞法是將供試品接種于指示細(xì)胞（無污染標(biāo)準(zhǔn)化Vero細(xì)胞或經(jīng)國家藥品檢定機構(gòu)認(rèn)可的其他細(xì)胞，供試品應(yīng)對該細(xì)胞生長無影響）中培養(yǎng)后，用特異熒光染料進行染色，支原體中的核酸也可以被著色。該方法的優(yōu)點是操作規(guī)范的情況下，很少出現(xiàn)假陰性結(jié)果，檢測精確度很高。

此外，還有核酸法、化學(xué)發(fā)光法等支原體檢測方法。其中，PCR法是目前最常用的方法，其原理是在支原體16S rRNA基因的保守區(qū)設(shè)計引物，通過檢測支原體DNA來檢測細(xì)胞中有無支原體的污染。如果有支原體的存在，則在瓊脂糖凝膠電泳或者熒光定量擴增時，就可以檢測到。這種方法的優(yōu)點是檢測靈敏度高、特異性好、檢測速度快。

德國MB公司生產(chǎn)的Venor?Gem qEP，符合歐洲藥典EP、美國藥典USP、日本藥典JP、中國藥典等各國藥典要求，可在細(xì)胞和生物制品，如Car-T、細(xì)胞免疫、抗體藥、疫苗等項目中，替代培養(yǎng)法進行支原體檢測。高特異性！一次檢測即可涵蓋，所有可能感染細(xì)胞的支原體物種。高靈敏度！檢測限可達(dá)≤10CFU/ml。