實驗室里,從事細胞學研究的各位小伙伴,最擔心的應(yīng)該就是細胞污染了。細胞污染一旦發(fā)生,無論何種類型,往往意味著,辛苦培養(yǎng)的細胞就要全軍覆沒。
今天,我們就來盤一盤,細胞培養(yǎng)過程中,容易被忽視的細胞污染。
微生物污染
體外培養(yǎng)的細胞可以說是危機四伏??諝庵衅≈鞣N細菌、真菌、霉菌、孢子、病毒以及支原體,稍有不慎,細胞就會被感染。
實驗前穿戴好防護用具,既是保護自己,也是保護實驗材料;實驗操作要規(guī)范;培養(yǎng)環(huán)境要定期打掃、清潔、消毒。新捷爾滅、支原體祛除噴霧都用起來!
MB支原體檢測、祛除系列產(chǎn)品
細胞交叉污染
另外,還會出現(xiàn)細胞交叉污染的情況。實驗人員經(jīng)常會遇到多種細胞同時培養(yǎng)的“多線操作”。所用的器具或者液體一旦混雜使用,就容易導(dǎo)致細胞交叉污染,一個培養(yǎng)體系里出現(xiàn)兩種不同的細胞,會使細胞生長狀態(tài)、形態(tài)發(fā)生變化、互相抑制,最終死亡。
一些外源化學物質(zhì)會對細胞產(chǎn)生或大或小的影響,此類影響可能抑制細胞生長,也可能加速細胞生長,但這些都是不可控的。
這些化學污染物來源廣泛:用過的器具未清洗干凈;實驗時小手一抖試劑加多了(比如氨基酸等);使用的添加劑純度不達標等等。
因此,在挑選試劑時,要購買在正規(guī)產(chǎn)品,盡量使用一次性滅菌器具,注意實驗操作規(guī)范。
物理污染通過影響細胞培養(yǎng)體系中的化學成分,來影響細胞生長。
簡單來說,就是一些物理因素導(dǎo)致培養(yǎng)基中一些成分發(fā)生變化,而引起整個細胞培養(yǎng)環(huán)境變質(zhì)。
那么,具體指哪些物理因素呢?
溫度
射線
震動
輻射
上述這些都有可能音系細胞代謝紊亂,導(dǎo)致細胞生長受阻,嚴重時細胞也會直接掛掉。
所以,在規(guī)劃細胞培養(yǎng)室以及實驗操作時,需要遵守規(guī)范,減少物理因素對細胞培養(yǎng)的影響。
細胞培養(yǎng)箱擺放在恒溫環(huán)境中,周圍環(huán)境不應(yīng)存在可能產(chǎn)生機械振動的儀器(這里點名:離心機)。
培養(yǎng)試劑儲存處要避免各類射線照射以及放射性物質(zhì)。
細胞房的冰箱應(yīng)選擇非透明門,如果是玻璃門要進行遮光處理。
使用培養(yǎng)基要提前預(yù)熱。
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