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Himedia新款CCA顯色培養(yǎng)基

2019-08-20 11:02來源:威正翔禹|締一生物


大腸桿菌(Escherichia coli),又叫大腸埃希氏菌,是動(dòng)物腸道中的正常寄居菌。大腸桿菌中的小部分是條件致病菌,在一定條件下可以引起人和多種動(dòng)物發(fā)生胃腸道感染或尿道等多種局部組織器官感染,還會(huì)引起關(guān)節(jié)炎、腦膜炎以及敗血型感染等。


大腸菌群指的是需氧及兼性厭氧、在37℃能分解乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣的革蘭氏陰性無芽孢桿菌。一般認(rèn)為該菌群細(xì)菌可包括大腸埃希氏菌、檸檬酸桿菌、產(chǎn)氣克雷伯氏菌和陰溝腸桿菌等。


大腸桿菌與大腸菌群常被用作檢驗(yàn)水質(zhì)的指示菌。大腸桿菌隨糞便排出體外;大腸菌群不僅生活在人的腸道,也生活在土壤和地表水中。因此,將大腸桿菌與大腸菌群共同作為指示菌,既可以評(píng)價(jià)水樣中的糞便污染程度,也可以評(píng)價(jià)水在凈化、儲(chǔ)存、運(yùn)輸?shù)拳h(huán)節(jié)中存在的安全問題。


我國(guó)《生活飲用水標(biāo)準(zhǔn)》(GB/T 5750.12-2006)《畜禽飲用水中總大腸菌群和大腸埃希氏菌的測(cè)定 酶底物法》(NY/T 1665-2008)提出了使用酶底物法檢測(cè)水質(zhì)中的總大腸菌群和大腸埃希氏菌,并提到“可選用市售商品化制品,以此計(jì)數(shù)來檢測(cè)水中總大腸菌群”。


《國(guó)際標(biāo)準(zhǔn) 地表水和廢水中大腸桿菌和大腸桿菌類細(xì)菌的檢測(cè)與計(jì)數(shù)》 (ISO9308-1.2014)采用的是濾膜法聯(lián)合CCA顯色培養(yǎng)基法,用于水中大腸桿菌和大腸菌群的計(jì)數(shù)。該方法得出結(jié)果的時(shí)間更短,而且無須額外的培養(yǎng)基進(jìn)行驗(yàn)證試驗(yàn)。但是,該方法最適合菌落數(shù)小于100的水樣,如:飲用水、自來水、消毒的池水,并不適用于地表水和井水。


據(jù)ISO資料顯示:CCA培養(yǎng)基的靈敏度為94%(大腸桿菌)和91%(大腸菌群),特異性為97%(大腸桿菌)和94%(大腸菌群),性能較好。而HiMedia公司提供的新一款CCA顯色培養(yǎng)基,批間差異極小,批次結(jié)果穩(wěn)定,重復(fù)性和準(zhǔn)確度進(jìn)一步提升。


Himedia公司生產(chǎn)的CCA顯色培養(yǎng)基(貨號(hào):M1991AI,品名:HiChrome? Chromogenic Coliform Ager w/1%Agar)推薦用于檢測(cè)水樣和臨床樣本中的大腸桿菌和大腸菌群(如水、污水、尿液等)。該培養(yǎng)基成分和性能符合ISO 9308-1:2014標(biāo)準(zhǔn)。


本品為選擇性培養(yǎng)基,在M1991I的基礎(chǔ)上做了改進(jìn),可從水樣中同時(shí)檢測(cè)大腸桿菌和大腸菌群(1)。其中,胰蛋白胨、丙酮酸鈉和山梨醇為生物體提供氮源物質(zhì)、可發(fā)酵的碳水化合物和其他必需的生長(zhǎng)營(yíng)養(yǎng)素。磷酸鹽提供緩沖能力。該培養(yǎng)基配方甚至可以幫助半致死受傷的大腸菌群恢復(fù)并迅速生長(zhǎng)。Tergitol-7抑制革蘭氏陽性菌和某些大腸菌群之外的革蘭氏陰性菌。


M1991AI含有三種顯色底物。大腸菌群產(chǎn)生的?-D-半乳糖苷酶裂解6-氯-3-吲哚氧基-β-D-吡喃半乳糖苷,產(chǎn)生粉紅色菌落。大腸桿菌產(chǎn)生的β-D葡萄糖醛酸酶裂解5-溴-4-氯-3-吲哚基-β-D-葡糖醛酸環(huán)己胺銨鹽(2)。大腸桿菌為β-半乳糖苷酶和β-D葡萄糖醛酸酶雙陽性,因而菌落呈深藍(lán)至紫色(圖1)。第三種顯色原IPTG用于增強(qiáng)顯色反應(yīng)。


圖1. HiCromeTM CCA顯色培養(yǎng)基,大腸桿菌呈深藍(lán)至紫色,大腸菌群呈粉紅色


該培養(yǎng)基接種時(shí)可采用平板傾注或表面涂布技術(shù)。也可采用薄膜過濾法。要確證大腸桿菌,可在深藍(lán)色至紫色菌落上加入一滴Kovacs試劑,出現(xiàn)櫻桃紅的顏色表明為陽性反應(yīng)。


參考文獻(xiàn)                                   

1. Jorgensen, J.H., Pfaller , M.A., Carroll, K.C., Funke, G., Landry, M.L., Richter, S.S and Warnock., D.W. (2015) Manual of Clinical Microbiology, 11th Edition. Vol. 1.


2.International Organization for Standardization. Water quality: Enumeration of E.coli and coliform bacteria. Part I-Membrane filtration methods for bacteria with low bacterial background flora. ISO 9308-1:2014.


HiMedia公司是國(guó)際知名微生物產(chǎn)品生產(chǎn)商,一直致力于微生物培養(yǎng)和鑒定產(chǎn)品的研發(fā)和生產(chǎn),并具有WHO-GMP認(rèn)證、ISO9001,ISO13485認(rèn)證,CE和FDA注冊(cè)登記。其產(chǎn)品已行銷全球140多個(gè)國(guó)家。


締一生物作為HiMedia公司在中國(guó)的代理商,在微生物培養(yǎng)和檢測(cè)領(lǐng)域,一如既往地為您帶來優(yōu)質(zhì)的服務(wù)。如需詳細(xì)了解,可訪問公司官網(wǎng):

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