上世紀(jì)90年代，在英國發(fā)生了脊髓灰質(zhì)炎疫苗引發(fā)克雅氏癥的事故（注釋1）。此類事件再次喚醒人們對(duì)安全生產(chǎn)的重視。安全性在疫苗或生物藥中極為重要，因?yàn)橐呙绫緫?yīng)是預(yù)防疾病，而非危害生命。

病毒性疫苗通常是在大規(guī)模培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞中生產(chǎn)的。除了病毒和后續(xù)工藝外，生產(chǎn)用細(xì)胞、生產(chǎn)用培養(yǎng)基、培養(yǎng)條件等都涉及到安全性。本文將就這些安全性進(jìn)行討論，重點(diǎn)則放在動(dòng)物源性原材料上：

1、在細(xì)胞基質(zhì)選擇方面，疫苗企業(yè)和監(jiān)管部門大多采取保守態(tài)度，不接受使用連續(xù)腫瘤原性細(xì)胞系生產(chǎn)病毒性疫苗。但在發(fā)展中國家，采用這種細(xì)胞系的大規(guī)模懸浮工藝生產(chǎn)的疫苗（比如手足口病疫苗和狂犬疫苗）非常便宜而且方便。連續(xù)腫瘤原性細(xì)胞系正在逐漸被人接受，因?yàn)榉肿由飳W(xué)方法可以檢測到是否最終存在癌基因序列，并對(duì)疫苗中的宿主殘留DNA進(jìn)行評(píng)估。

因?yàn)樯鲜龅谋Ｊ貞B(tài)度，原代細(xì)胞仍被用于疫苗的生產(chǎn)，但這種做法應(yīng)盡快制止。因?yàn)橐苊庖蚴褂迷?xì)胞而引入外源因子，從而造成潛在的安全風(fēng)險(xiǎn)。

2、第二個(gè)安全問題和培養(yǎng)基成分有關(guān)。由于歷史原因、可獲得的便捷性以及價(jià)格因素，所有傳統(tǒng)疫苗的生產(chǎn)都使用動(dòng)物源性原材料，例如血清。然而，血清的使用有幾個(gè)不利因素，特別是污染物和外源因子(病毒、朊病毒等)被引入終產(chǎn)品的潛在風(fēng)險(xiǎn)。

含血清培養(yǎng)基通常用于病毒接種前的細(xì)胞生長階段，有時(shí)也用于病毒生產(chǎn)階段（病毒接種至病毒收獲）。

使用無血清/無蛋白成分培養(yǎng)基是可行的。對(duì)于原代細(xì)胞和已建立的二倍體細(xì)胞，使用無血清培養(yǎng)基并不容易，因?yàn)檫€需要向成分復(fù)雜的無血清培養(yǎng)基中添加一到幾種生長因子，且這類無血清培養(yǎng)基開發(fā)起來難度較大，配方大多保密。

但對(duì)于連續(xù)非腫瘤細(xì)胞系和腫瘤原性細(xì)胞系，例如Vero或BHK21 C13細(xì)胞，情況就不同了。這類細(xì)胞很容易在無血清甚至無動(dòng)物蛋白成分培養(yǎng)基中生長，其生產(chǎn)病毒的效率等同于含血清培養(yǎng)基，甚至?xí)茫缬肂HK-21細(xì)胞或Vero細(xì)胞生產(chǎn)狂犬病毒，用Vero細(xì)胞生產(chǎn)脊髓灰質(zhì)炎病毒。1999年,MDCK細(xì)胞生產(chǎn)流感疫苗也全部采用了無血清培養(yǎng)。

3、進(jìn)一步，胰蛋白酶作為貼壁細(xì)胞傳代用的解離酶，由于其來自動(dòng)物胰臟（主要是豬），在疫苗生產(chǎn)中也構(gòu)成安全隱患。但它可被非動(dòng)物源蛋白酶或重組胰蛋白酶來替代。

4、病毒性疫苗的之后工藝也同樣涉及到動(dòng)物源材料的使用。這里只討論在凍干配方中加入的穩(wěn)定劑，其中血清白蛋白可以用重組人血清白蛋白替代。穩(wěn)定劑的安全問題和其他階段使用動(dòng)物源性材料的安全問題同樣重要。

5. 病毒接種液本身是用培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞產(chǎn)生的。關(guān)于接種液（包含細(xì)胞培養(yǎng)物、病毒、培養(yǎng)基）的安全性，病毒疫苗的安全考慮因素也適用于它。細(xì)胞傳代次數(shù)、病毒滴度等因素都同等重要。

顯而易見，與生物安全性相關(guān)的所有問題，如細(xì)胞基質(zhì)、培養(yǎng)基和細(xì)胞解離都能容易解決。對(duì)于大多數(shù)人用疫苗，都可采用安全的且經(jīng)濟(jì)上可負(fù)擔(dān)的替代材料來生產(chǎn)(例如用無血清培養(yǎng)基中的Vero細(xì)胞生產(chǎn)脊髓灰質(zhì)炎病毒）。實(shí)際上，要開發(fā)、驗(yàn)證和審批生物性安全疫苗的新型生產(chǎn)工藝，原有的**位考慮因素——經(jīng)濟(jì)因素，應(yīng)該被原為第二位考慮因素的生物安全性因素所替換。

注釋：1994年2名口服脊髓灰質(zhì)炎疫苗的英國青少年發(fā)展為克雅氏癥，后被證實(shí)，兩名青少年所服疫苗為同一批次，且疫苗生產(chǎn)用材料為英國牛源。也有人懷疑并認(rèn)為兩名青少年的得病并非疫苗引起。不論如何，英國政府召回了該批疫苗。

參考文獻(xiàn)：

O.-W. Merten. Safety for vaccines. Cytotechnology.2000: 34: 181–183